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牛ELISA試劑盒操作使用步驟是怎樣的

 更新時間:2022-01-18 點擊量:723
   牛(niu)ELISA試劑(ji)盒(he)使用步驟是怎樣的:
  1.即將(jiang)進(jin)行(xing)(xing)試驗的版孔(kong)進(jin)行(xing)(xing)設定(ding)(ding)好,規(gui)范品5個點,每個點設定(ding)(ding)平行(xing)(xing),需(xu)求用到10個孔(kong),空白只需(xu)1個孔(kong)。剩下(xia)孔(kong)能夠做為樣本孔(kong)
  2.稀釋(shi)規(gui)范(fan)(fan),準備好(hao)5個EP管(guan),然后在每個EP管(guan)中(zhong)(zhong)(zhong)參(can)加(jia)(jia)150微(wei)升(sheng)規(gui)范(fan)(fan)稀釋(shi)液,編上(shang)(shang)編碼,分別為1,2,3,4,5,在1號管(guan)中(zhong)(zhong)(zhong)參(can)加(jia)(jia)150規(gui)范(fan)(fan)品,用(yong)槍頭重復吹打10次左右(留意(yi)操控(kong)起伏不要(yao)過大簡單發生氣(qi)泡)如果有渦(wo)旋儀(yi)(yi)能夠(gou)在渦(wo)旋儀(yi)(yi)上(shang)(shang)渦(wo)旋5秒左右,然后換(huan)槍頭,在1號管(guan)中(zhong)(zhong)(zhong)取150微(wei)升(sheng)參(can)加(jia)(jia)到(dao)2號管(guan),后面進程(cheng)一次類(lei)推(tui)。終(zhong)稀釋(shi)完,前面4個管(guan)中(zhong)(zhong)(zhong)每管(guan)液體在150微(wei)升(sheng),5號管(guan)為300微(wei)升(sheng)。濃度(du)是從大到(dao)小。
  3.規范、樣(yang)本、空(kong)白加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)樣(yang):規范是每個(ge)濃度(du)點2個(ge)孔(做平行(xing)),每孔參(can)加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)50微(wei)升,加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)樣(yang)進程中(zhong)留意(yi)換槍(qiang)頭,樣(yang)本孔中(zhong)每孔參(can)加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)50微(wei)升,加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)樣(yang)進程中(zhong)留意(yi)換槍(qiang)頭,空(kong)白孔參(can)加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)50微(wei)升蒸餾(liu)水。特別要闡明的是,規范加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)樣(yang)和樣(yang)本加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)樣(yang)盡量操控在15分鐘(zhong)內加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)完,如(ru)果時(shi)刻拖(tuo)的太長,會導致前面(mian)孔先反響后(hou)面(mian)孔才開端反響,這樣(yang)數值誤差過大(da)。加(jia)(jia)(jia)(jia)(jia)完樣(yang)后(hou)蓋上封板膜,至(zhi)37攝氏度(du)孵育30分鐘(zhong).
  4.洗(xi)版,在孵育進(jin)程中能(neng)夠將洗(xi)滌(di)液(ye)(ye)配好,20ml30倍濃縮洗(xi)滌(di)液(ye)(ye)用(yong)蒸餾(liu)水(shui)或(huo)許去離(li)子(zi)水(shui)定容到600ml即(ji)可。每孔參加250-300微升的洗(xi)滌(di)液(ye)(ye)(不要(yao)漫過版孔),(如(ru)果(guo)有(you)震動儀(yi)的話,能(neng)夠講板子(zi)放入震動儀(yi)上5秒左右(you),然(ran)(ran)后靜止(zhi)三(san)十秒,沒(mei)有(you)請疏忽次(ci)進(jin)程)將板子(zi)在桌子(zi)上晃動5秒左右(you),然(ran)(ran)后靜置30秒,甩干,決定。闡明:甩干進(jin)程盡量要(yao)快,1秒內就(jiu)能(neng)夠完(wan)結(jie)(jie),不要(yao)漸(jian)(jian)漸(jian)(jian)歪斜倒掉液(ye)(ye)體(ti),直接(jie)翻板甩掉液(ye)(ye)體(ti)即(ji)可。決定進(jin)程需(xu)求在桌子(zi)上墊(dian)一層吸(xi)水(shui)紙或(huo)許濾(lv)紙,版孔朝下拍(pai)幾下,拍(pai)干差異主(zhu)要(yao)看吸(xi)水(shui)紙和濾(lv)紙上沒(mei)有(you)顯著的水(shui)漬為(wei)完(wan)結(jie)(jie)。
  5.每孔(kong)參加(jia)50微升的酶標試劑,此處在空(kong)白(bai)孔(kong)中不需求加(jia)(空(kong)白(bai)孔(kong)為空(kong)),孵育30分(fen)鐘。
  6.洗版進程與4一樣。
  7.顯色(se)(se)(se),先每(mei)孔中參加50微升(sheng)(sheng)的(de)顯色(se)(se)(se)A液(ye),然后每(mei)孔中參加50微升(sheng)(sheng)顯色(se)(se)(se)B液(ye)。避光37攝氏度顯色(se)(se)(se)15分鐘
  8.停(ting)止,每孔參加50微升(sheng)的(de)停(ting)止液(ye)(ye),留意(yi),加完(wan)停(ting)止液(ye)(ye)必須在15分鐘內讀(du)數,超越時(shi)刻(ke)(ke)讀(du)數無效。在規則時(shi)刻(ke)(ke)內讀(du)數都是有(you)用的(de)。