孔雀石綠膠體金檢測卡

 1 原理(li)及用途

孔雀石綠膠體金檢測卡應用競爭抑(yi)制膠體(ti)金免疫層(ceng)析的原(yuan)理制成，用于檢測蜂蜜、組(zu)織、肝臟(zang)等樣(yang)本中(zhong)的孔雀(que)石(shi)綠代(dai)謝物。

樣本溶(rong)液滴(di)入檢測卡的加樣孔(kong)后，樣本溶(rong)液中的孔(kong)雀石綠代謝(xie)物與金標(biao)(biao)抗體(ti)相結合，從而阻(zu)止金標(biao)(biao)抗體(ti)與纖維(wei)素膜(mo)上孔雀石綠偶(ou)聯物結合。當(dang)樣(yang)本(ben)溶(rong)液中的(de)孔雀(que)石綠代(dai)謝(xie)物含(han)量(liang)大于(yu)檢(jian)測(ce)*檢(jian)測(ce)線(xian)不顯(xian)色，結果(guo)為陽性；當(dang)樣本溶(rong)液中孔雀石綠代謝物含量小于檢測*檢測線(xian)顯(xian)紫紅色，結果為陰性。

2 技術指標(biao)

2.1 試劑卡靈敏度：1ppb（ng/ml）

    對樣本的最終檢測限須以(yi)試劑(ji)卡(ka)靈敏度(du)乘以(yi)樣本處(chu)理的稀(xi)釋(shi)比例(li)。

2.2 樣本檢測下限：

蜂蜜、組織(zhi)、腸衣、肝臟(zang)………………………0.5ppb

3 試劑盒組成

檢測卡……………………50個/盒(he)

樣本復溶液……………………1瓶

衍生化試劑……………………3瓶

說明(ming)書(shu)…………………………1份

4 需要的器(qi)材和試劑

4.1 儀器(qi)：均質器(qi) 、氮氣吹(chui)干(gan)裝置、振蕩(dang)器(qi)、離(li)心機、刻度移液管、天平（感量(liang)0.01g）

4.2 微量移液器：單道20µl-200µl，100µl-1000µl

4.3試劑：乙酸乙酯、正己烷、氫氧化鈉、濃HCl、K2HPO4·3H2O

5 樣本(ben)前(qian)處理(li)

5.1 樣本處(chu)理前須知：

實驗(yan)器具(ju)必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗(yan)結果。

5.2 配液：

配液1：0.5M  K2HPO4 溶液

    稱(cheng)11.4g K2HPO4?3H2O加去離子(zi)水溶解定溶至100ml。

配(pei)液(ye)2：1M  HCL

  ;  8.6mL濃(nong)HCL加(jia)去離子水定(ding)容至100mL。

配液(ye)3：1M  NaOH溶液(ye)

    稱取4g NaOH，加去離子水定容至100ml

5.3蜂蜜、組織、腸衣、肝臟樣(yang)本(ben)處理方法

1）稱取(qu)2±0.05g均質樣本于離心管中(zhong)，加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸(suan)溶(rong)液和(he)600μl衍生化(hua)試劑，振蕩5分(fen)鐘(zhong)；

2）65℃水浴孵育30分鐘；

3）分別(bie)加入1ml 0.5M K2HPO4 溶液，0.4ml 1M NaOH溶液和(he)5ml的乙(yi)酸乙(yi)酯，振蕩5分鐘；

4）室溫下4000轉/分，離心5分鐘；

5）取出2.5ml的上(shang)層液(ye)到(dao)另一個離心管中，50-60℃氮氣(qi)或空氣(qi)吹干；

6）用1ml正已(yi)烷溶解殘留物，加(jia)入0.5ml復溶液充分振(zhen)蕩混合(he)30秒(miao)；室溫4000轉(zhuan)/分，離(li)心5分鐘；

7）上(shang)層(ceng)為正已(yi)烷(wan)，取(qu)下(xia)層(ceng)樣本(ben)液用于分析。

濃縮倍數為：2    檢測(ce)下限：0.5ppb

6 實驗步驟

6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔(jie)凈的臺面上。

6.2 用(yong)配套吸(xi)管吸(xi)取已準(zhun)備好的(de)樣本(ben)液體，緩慢(man)、逐滴的(de)（應(ying)避免泡(pao)沫產生）滴加(jia)2-3滴（約60ul）到加(jia)樣孔（S）內。

6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷(duan)結果。

7 結果判斷

陰(yin)性（-）：C線、T線均顯(xian)紅(hong)色，表示樣本中(zhong)孔雀石綠濃度低于檢測下限(xian)，或不含有。

陽(yang)性（+）：C線(xian)(xian)顯(xian)紅色(se)，T線(xian)(xian)不(bu)顯(xian)色(se)，則表示樣本中孔(kong)雀石綠濃度高于(yu)檢測(ce)下限(xian)。

無(wu)效：未出現質控C線，表明操(cao)作過程(cheng)不正確或檢測卡(ka)已(yi)失效。

8 注意事(shi)項

8.1 過期或鋁(lv)箔(bo)袋破損的產品，均不(bu)可使用。

8.2 檢(jian)測(ce)卡從冰箱中(zhong)取出時應(ying)恢復到室溫后(hou)打開，打開的檢(jian)測(ce)卡應(ying)盡快使用以免(mian)受潮后(hou)失(shi)效。

8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色(se)膜(mo)面。

8.4 取液(ye)滴管不可混用，以免交叉污(wu)染。

8.5 待(dai)檢樣品溶液(ye)需清亮、無混濁顆粒、無細菌污(wu)染，否則(ze)容易導致(zhi)阻塞、顯(xian)色不明顯(xian)等(deng)異常現(xian)象(xiang)，從而(er)影(ying)響(xiang)實驗(yan)結果的判定。

9 貯(zhu)藏及保存期

儲藏條件：試劑盒于2-30℃干燥(zao)環(huan)境(jing)下保存。

保 質 期(qi)：該產品有效期(qi)為(wei)1年，生(sheng)產日期(qi)見(jian)包裝盒。