一、羊骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA定量試劑盒(he)實驗詳細介紹

中文名稱:羊骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA定量試劑盒實驗

規格(ge): 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:羊ELISA試(shi)劑盒

檢測波長:450 nm

所需(xu)樣本(ben)體積: 50ul

適用(yong)范圍:僅供科研，不(bu)得用(yong)于臨床(chuang)診斷。

保存及有(you)效(xiao)期:2-8℃，六個月

檢測(ce)樣本種(zhong)類(lei):用(yong)于測(ce)定(ding)血(xue)清(qing)(qing)，血(xue)漿(jiang)及相關液體等樣本的含量或者(zhe)表達。例(li)如適合檢測(ce)包括血(xue)清(qing)(qing)、血(xue)漿(jiang)、尿(niao)液、胸腹水(shui)、灌洗(xi)液、腦(nao)脊液、細胞培養上清(qing)(qing)、組織(zhi)勻漿(jiang)等標本。

臻(zhen)科生物供應的種屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子(zi)、昆蟲、豬牛羊(yang)、雞(ji)鴨鵝、植物ELISA試劑盒等

二、實驗原理

本(ben)試(shi)劑(ji)盒應用雙抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)夾心法測(ce)定(ding)(ding)標(biao)本(ben)中羊(yang)骨(gu)堿(jian)(jian)性(xing)磷(lin)(lin)(lin)酸酶(BALP)水(shui)平。用純化(hua)的(de)(de)羊(yang)骨(gu)堿(jian)(jian)性(xing)磷(lin)(lin)(lin)酸酶(BALP)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)包(bao)(bao)被(bei)微孔板，制(zhi)成(cheng)固相抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，往包(bao)(bao)被(bei)單抗(kang)(kang)(kang)的(de)(de)微孔中依次加入(ru)骨(gu)堿(jian)(jian)性(xing)磷(lin)(lin)(lin)酸酶(BALP)，再與HRP 標(biao)記的(de)(de)骨(gu)堿(jian)(jian)性(xing)磷(lin)(lin)(lin)酸酶(BALP)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)結合(he)，形成(cheng)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)-抗(kang)(kang)(kang)原-酶標(biao)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)復合(he)物，經過(guo)*洗滌(di)后(hou)加底物TMB 顯色(se)。TMB 在HRP 酶的(de)(de)催化(hua)下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色(se)，并在酸的(de)(de)作用下(xia)轉化(hua)成(cheng)Zui終的(de)(de)黃色(se)。顏色(se)的(de)(de)深淺和樣品中的(de)(de)骨(gu)堿(jian)(jian)性(xing)磷(lin)(lin)(lin)酸酶(BALP)呈正相關(guan)。用酶標(biao)儀在450nm波長(chang)下(xia)測(ce)定(ding)(ding)吸光度(du)（OD 值(zhi)），通過(guo)標(biao)準曲線計算(suan)樣品中羊(yang)骨(gu)堿(jian)(jian)性(xing)磷(lin)(lin)(lin)酸酶(BALP)濃(nong)度(du)。

三(san)、試劑盒組成

四(si)、操作(zuo)步驟

五(wu)、試劑盒計算

以標(biao)(biao)(biao)準物的濃(nong)度為(wei)橫坐(zuo)標(biao)(biao)(biao)，OD 值為(wei)縱坐(zuo)標(biao)(biao)(biao)，在坐(zuo)標(biao)(biao)(biao)紙上(shang)繪出標(biao)(biao)(biao)準曲線(xian)，根(gen)據樣品(pin)的

OD 值由標(biao)準曲線查出(chu)相(xiang)應的濃度；再乘以稀釋倍數；或(huo)用標(biao)準物(wu)的濃度與OD 值計算(suan)出(chu)標(biao)

準曲線的(de)直(zhi)線回歸(gui)方程(cheng)式，將樣(yang)品的(de)OD 值代入方程(cheng)式，計算出(chu)樣(yang)品濃度，再乘以稀(xi)釋(shi)倍數，

即為樣品的實際濃(nong)度。

六、注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huan)境中取(qu)出應在室溫平衡15-30 分(fen)鐘后方可使用(yong)，酶標包被板開(kai)封后如(ru)未

用完，板條應裝(zhuang)入密封(feng)袋中保存(cun)。

2．濃洗滌(di)液(ye)可能會有結晶析(xi)出(chu)，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌(di)時不影響結果。

3．各步加樣(yang)均應使(shi)用加樣(yang)器，并經常校對(dui)其準確(que)性，以避免試(shi)驗(yan)誤差。一次加樣(yang)時間

控(kong)制(zhi)在(zai)5 分鐘內，如(ru)標本數量多，推薦使用排槍加(jia)樣。

4． 請每(mei)次測定的(de)同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值

大于標準(zhun)品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)一(yi)定(ding)倍數（n 倍）后再測定(ding)，計

算時請Zui后乘以總稀釋(shi)倍數(shu)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底(di)物請避光保存(cun)。

7．嚴格按照(zhao)說明書的操(cao)作(zuo)進(jin)行，試(shi)驗結果判定必須以酶標儀(yi)讀數為準.

8．所(suo)有樣品，洗滌液(ye)和各種廢棄物(wu)都(dou)應按傳(chuan)染物(wu)處理。

9．本試劑不(bu)同批號組分不(bu)得混用。

七、特別提醒(xing)

1.標本(ben)采集后盡早進行提取，提取按相關文獻(xian)進行，提取后應盡快進行實(shi)驗(yan)。若(ruo)不能

馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2.不能檢測(ce)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制(zhi)辣(la)根(gen)過氧(yang)化物酶的（HRP）活性。

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