一、馬過氧化氫酶(CAT)ELISA定量試劑盒詳細介紹

中文名稱:馬過氧化氫酶(CAT)ELISA定量試劑盒

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬(shu):馬ELISA試劑盒

檢測(ce)波(bo)長(chang):450 nm

所需(xu)樣本體積: 50ul

適用范圍:僅(jin)供科研，不得用于臨床(chuang)診斷。

保存及有效期:2-8℃，六個月

檢測(ce)樣本(ben)種類(lei):用于測(ce)定血清(qing)，血漿(jiang)及相關液(ye)體等樣本(ben)的含量或(huo)者表(biao)達。例如適合(he)檢測(ce)包括(kuo)血清(qing)、血漿(jiang)、尿液(ye)、胸(xiong)腹水、灌洗液(ye)、腦脊液(ye)、細胞培養上清(qing)、組織(zhi)勻漿(jiang)等標本(ben)。

臻科(ke)生物供(gong)應的種屬(shu)有：人、大鼠(shu)、小(xiao)鼠(shu)、豚鼠(shu)、兔子(zi)、昆蟲、豬牛(niu)羊、雞(ji)鴨鵝、植物ELISA試劑盒(he)等(deng)

二(er)、實驗(yan)原理

本試劑(ji)盒(he)應(ying)用(yong)(yong)(yong)雙抗(kang)(kang)體(ti)夾心法測(ce)定標(biao)(biao)本中(zhong)(zhong)馬(ma)過(guo)(guo)氧化氫酶(mei)(mei)(mei)(CAT)水平。用(yong)(yong)(yong)純化的(de)馬(ma)過(guo)(guo)氧化氫酶(mei)(mei)(mei)(CAT)抗(kang)(kang)體(ti)包被微(wei)孔(kong)板，制成(cheng)固相抗(kang)(kang)體(ti)，往包被單(dan)抗(kang)(kang)的(de)微(wei)孔(kong)中(zhong)(zhong)依次加入過(guo)(guo)氧化氫酶(mei)(mei)(mei)(CAT)，再與HRP 標(biao)(biao)記的(de)過(guo)(guo)氧化氫酶(mei)(mei)(mei)(CAT)抗(kang)(kang)體(ti)結合，形成(cheng)抗(kang)(kang)體(ti)-抗(kang)(kang)原-酶(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)抗(kang)(kang)體(ti)復合物，經過(guo)(guo)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶(mei)(mei)(mei)的(de)催化下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍色，并(bing)在酸的(de)作用(yong)(yong)(yong)下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)Zui終的(de)黃色。顏(yan)色的(de)深淺和樣品(pin)中(zhong)(zhong)的(de)過(guo)(guo)氧化氫酶(mei)(mei)(mei)(CAT)呈(cheng)正相關。用(yong)(yong)(yong)酶(mei)(mei)(mei)標(biao)(biao)儀(yi)在450nm波長下(xia)測(ce)定吸光度（OD 值），通(tong)過(guo)(guo)標(biao)(biao)準曲線(xian)計算樣品(pin)中(zhong)(zhong)馬(ma)過(guo)(guo)氧化氫酶(mei)(mei)(mei)(CAT)濃度。

三、試劑盒組成

四、操(cao)作步驟

五、試劑盒計算(suan)

以(yi)標(biao)準(zhun)物的(de)濃度(du)為橫坐標(biao)，OD 值為縱(zong)坐標(biao)，在坐標(biao)紙上繪出標(biao)準(zhun)曲線，根據樣品的(de)

OD 值(zhi)由標(biao)準曲線查出相(xiang)應的濃度；再乘以(yi)稀釋(shi)倍數(shu)；或(huo)用標(biao)準物的濃度與OD 值(zhi)計算出標(biao)

準曲線的(de)直線回(hui)歸方(fang)程(cheng)式(shi)，將樣品(pin)的(de)OD 值代入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi)，計算(suan)出樣品(pin)濃度(du)，再乘(cheng)以稀釋倍數，

即為樣品的實際濃度。

六(liu)、注(zhu)意事項

1．試劑(ji)盒(he)從冷藏(zang)環境中(zhong)取出應在室溫(wen)平衡15-30 分鐘后(hou)方(fang)可使用，酶標包被板開封后(hou)如未

用(yong)完(wan)，板條應裝入(ru)密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(hui)有(you)結晶析出，稀釋時(shi)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shi)不影響結果。

3．各步(bu)加(jia)(jia)樣(yang)均應使用加(jia)(jia)樣(yang)器，并(bing)經(jing)常校對其(qi)準確性，以避免試驗誤差。一次加(jia)(jia)樣(yang)時間

控制(zhi)在5 分鐘內，如標本(ben)數(shu)量多，推(tui)薦使用排槍(qiang)加樣。

4． 請每次測(ce)定的同(tong)時(shi)做標(biao)準曲線，做復孔。如標(biao)本(ben)中(zhong)待測(ce)物(wu)質含量過(guo)高（樣(yang)本(ben)OD 值

大于標準品(pin)孔di一孔的OD 值(zhi)），請先(xian)用樣品(pin)稀(xi)釋液稀(xi)釋一定倍(bei)數(shu)（n 倍(bei)）后再測定，計

算時請Zui后乘以(yi)總稀釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。

5． 封板(ban)膜只限一次性(xing)使用(yong)，以避免交叉污染(ran)。

6．底物請避(bi)光保存。

7．嚴格(ge)按(an)照說明書(shu)的(de)操(cao)作進(jin)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準(zhun).

8．所有樣品，洗滌液和(he)各種廢(fei)棄(qi)物(wu)都(dou)應按傳染物(wu)處理。

9．本(ben)試劑不同批(pi)號組(zu)分不得混用。

七、特別提醒(xing)

1.標(biao)本采集后(hou)盡(jin)早進行(xing)提取，提取按相關文(wen)獻進行(xing)，提取后(hou)應盡(jin)快進行(xing)實驗。若不能

馬上(shang)進行試驗，可(ke)將標本(ben)放于(yu)-20℃保(bao)存，但應避免反復凍融

2.不能檢測(ce)含NaN3 的樣品(pin)，因(yin)NaN3 抑制(zhi)辣根過(guo)氧(yang)化物酶(mei)的（HRP）活性(xing)。

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