一、猴子(zi)(zi)巨噬細胞移動抑制因子(zi)(zi)(MIF)ELISA定量試(shi)劑盒詳細介紹

中文名稱:猴子巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA定量試劑盒

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬(shu):猴ELISA試劑盒

檢測波(bo)長(chang):450 nm

所需(xu)樣本體(ti)積: 50ul

適用范圍:僅供(gong)科研，不得用于臨床診斷(duan)。

保存及有效(xiao)期:2-8℃，六個月

檢測樣本(ben)種類:用(yong)于測定(ding)血清(qing)，血漿及相(xiang)關(guan)液(ye)體(ti)等樣本(ben)的含(han)量(liang)或者表達。例如適合檢測包括血清(qing)、血漿、尿液(ye)、胸腹水、灌洗(xi)液(ye)、腦脊液(ye)、細胞培養上清(qing)、組織勻漿等標本(ben)。

臻科生(sheng)物供應的種屬有：人、大鼠(shu)、小鼠(shu)、豚鼠(shu)、兔子、昆蟲、豬(zhu)牛(niu)羊、雞鴨(ya)鵝、植物ELISA試劑盒(he)等

二(er)、實驗(yan)原(yuan)理

本(ben)(ben)試劑盒應(ying)用(yong)雙抗(kang)(kang)(kang)體夾心法測(ce)定標(biao)本(ben)(ben)中(zhong)猴(hou)(hou)子巨(ju)(ju)(ju)噬細(xi)胞移動(dong)(dong)(dong)抑(yi)(yi)制(zhi)因(yin)(yin)子(MIF)水平。用(yong)純化(hua)(hua)的(de)猴(hou)(hou)子巨(ju)(ju)(ju)噬細(xi)胞移動(dong)(dong)(dong)抑(yi)(yi)制(zhi)因(yin)(yin)子(MIF)抗(kang)(kang)(kang)體包(bao)被(bei)微孔(kong)板，制(zhi)成(cheng)固相抗(kang)(kang)(kang)體，往(wang)包(bao)被(bei)單抗(kang)(kang)(kang)的(de)微孔(kong)中(zhong)依次加入巨(ju)(ju)(ju)噬細(xi)胞移動(dong)(dong)(dong)抑(yi)(yi)制(zhi)因(yin)(yin)子(MIF)，再(zai)與HRP 標(biao)記的(de)巨(ju)(ju)(ju)噬細(xi)胞移動(dong)(dong)(dong)抑(yi)(yi)制(zhi)因(yin)(yin)子(MIF)抗(kang)(kang)(kang)體結(jie)合，形成(cheng)抗(kang)(kang)(kang)體-抗(kang)(kang)(kang)原-酶(mei)標(biao)抗(kang)(kang)(kang)體復合物，經過*洗滌后加底(di)物TMB 顯(xian)色(se)。TMB 在(zai)HRP 酶(mei)的(de)催化(hua)(hua)下(xia)(xia)轉化(hua)(hua)成(cheng)藍色(se)，并在(zai)酸的(de)作用(yong)下(xia)(xia)轉化(hua)(hua)成(cheng)Zui終的(de)黃(huang)色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深淺和樣品中(zhong)的(de)巨(ju)(ju)(ju)噬細(xi)胞移動(dong)(dong)(dong)抑(yi)(yi)制(zhi)因(yin)(yin)子(MIF)呈正相關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在(zai)450nm波(bo)長(chang)下(xia)(xia)測(ce)定吸光(guang)度（OD 值），通過標(biao)準曲線計算樣品中(zhong)猴(hou)(hou)子巨(ju)(ju)(ju)噬細(xi)胞移動(dong)(dong)(dong)抑(yi)(yi)制(zhi)因(yin)(yin)子(MIF)濃度。

三、試劑盒組成

四、操作步驟

五、試劑盒計算

以標(biao)準物的(de)濃度為(wei)(wei)橫坐(zuo)標(biao)，OD 值為(wei)(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)，在坐(zuo)標(biao)紙上繪(hui)出(chu)標(biao)準曲(qu)線，根(gen)據(ju)樣品的(de)

OD 值由(you)標準(zhun)曲線查出(chu)相應的濃(nong)度(du)(du)；再(zai)乘以稀(xi)釋倍(bei)數；或用標準(zhun)物(wu)的濃(nong)度(du)(du)與(yu)OD 值計算(suan)出(chu)標

準曲線的直線回歸方(fang)程(cheng)式，將樣品的OD 值代入方(fang)程(cheng)式，計算(suan)出(chu)樣品濃度(du)，再乘以稀釋倍(bei)數(shu)，

即為樣品的(de)實(shi)際濃度。

六、注(zhu)意事項(xiang)

1．試劑盒(he)從冷藏環(huan)境中取(qu)出應(ying)在(zai)室溫平衡15-30 分鐘后方可使用(yong)，酶標包被板開(kai)封后如(ru)未

用完(wan)，板條(tiao)應裝(zhuang)入密封袋(dai)中保存。

2．濃洗滌(di)液可能會有(you)結(jie)晶析出，稀釋時可在水浴中加(jia)溫助溶，洗滌(di)時不影響結(jie)果。

3．各(ge)步加(jia)樣(yang)均應使(shi)用加(jia)樣(yang)器(qi)，并經常校對其(qi)準確性，以避免試驗誤(wu)差。一次加(jia)樣(yang)時間

控制在(zai)5 分鐘(zhong)內，如(ru)標本(ben)數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請(qing)每次測定(ding)的同(tong)時做(zuo)標準曲(qu)線，做(zuo)復孔(kong)。如標本(ben)中待測物(wu)質(zhi)含(han)量過高（樣本(ben)OD 值

大(da)于標準(zhun)品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀(xi)釋液稀(xi)釋一定倍數（n 倍）后再測定，計

算時(shi)請Zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜(mo)只限一次(ci)性使(shi)用，以避免交叉(cha)污染。

6．底物請避光(guang)保存。

7．嚴格(ge)按照說明書的操作進(jin)行(xing)，試驗結果判定必須以酶標(biao)儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢(fei)棄(qi)物(wu)都應(ying)按傳染物(wu)處理。

9．本試劑不(bu)同批號組分不(bu)得混(hun)用。

七、特別提(ti)醒

1.標本(ben)采集(ji)后盡(jin)早進(jin)行提取(qu)(qu)，提取(qu)(qu)按相關文獻(xian)進(jin)行，提取(qu)(qu)后應(ying)盡(jin)快(kuai)進(jin)行實驗。若不能(neng)

馬上進行試(shi)驗，可將標本(ben)放(fang)于-20℃保存，但應避免反復凍融

2.不(bu)能檢測含NaN3 的樣品，因(yin)NaN3 抑制辣(la)根過氧化物(wu)酶的（HRP）活性。

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