一、犬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA定量試劑盒實驗詳細(xi)介紹

中文名稱:犬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA定量試劑盒實驗

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:犬ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用(yong)范圍:僅供(gong)科研(yan)，不得(de)用(yong)于臨(lin)床診斷。

保(bao)存及(ji)有效期:2-8℃，六個月

檢(jian)測樣(yang)本種類:用于測定血(xue)清(qing)，血(xue)漿(jiang)及相關液(ye)體等樣(yang)本的含(han)量或者(zhe)表達。例如適(shi)合(he)檢(jian)測包括血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、尿液(ye)、胸腹水、灌洗液(ye)、腦脊液(ye)、細胞(bao)培養上清(qing)、組織勻漿(jiang)等標(biao)本。

臻科生(sheng)物供應的種(zhong)屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、昆蟲、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試(shi)劑盒等

二、實驗原理(li)

本(ben)(ben)試劑盒應用雙抗(kang)體夾心(xin)法測(ce)定(ding)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)中(zhong)(zhong)犬窖(jiao)(jiao)蛋(dan)白(bai)Caveolin-1(CAV1)水平。用純化(hua)(hua)的(de)(de)(de)(de)犬窖(jiao)(jiao)蛋(dan)白(bai)Caveolin-1(CAV1)抗(kang)體包(bao)被(bei)微孔板(ban)，制成固相(xiang)(xiang)抗(kang)體，往(wang)包(bao)被(bei)單抗(kang)的(de)(de)(de)(de)微孔中(zhong)(zhong)依(yi)次加入(ru)窖(jiao)(jiao)蛋(dan)白(bai)Caveolin-1(CAV1)，再(zai)與HRP 標(biao)(biao)(biao)記的(de)(de)(de)(de)窖(jiao)(jiao)蛋(dan)白(bai)Caveolin-1(CAV1)抗(kang)體結合，形成抗(kang)體-抗(kang)原-酶(mei)標(biao)(biao)(biao)抗(kang)體復合物(wu)，經過(guo)*洗滌后加底物(wu)TMB 顯色(se)(se)。TMB 在HRP 酶(mei)的(de)(de)(de)(de)催化(hua)(hua)下轉(zhuan)化(hua)(hua)成藍色(se)(se)，并在酸的(de)(de)(de)(de)作用下轉(zhuan)化(hua)(hua)成Zui終的(de)(de)(de)(de)黃色(se)(se)。顏色(se)(se)的(de)(de)(de)(de)深淺和樣品中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)窖(jiao)(jiao)蛋(dan)白(bai)Caveolin-1(CAV1)呈正相(xiang)(xiang)關(guan)。用酶(mei)標(biao)(biao)(biao)儀(yi)在450nm波(bo)長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)（OD 值），通過(guo)標(biao)(biao)(biao)準曲線計(ji)算樣品中(zhong)(zhong)犬窖(jiao)(jiao)蛋(dan)白(bai)Caveolin-1(CAV1)濃度(du)。

三、試劑盒組成

四(si)、操作步驟

五(wu)、試劑盒計算

以標(biao)準物的(de)濃度為(wei)橫坐(zuo)標(biao)，OD 值(zhi)為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，在(zai)坐(zuo)標(biao)紙上繪出標(biao)準曲線(xian)，根據樣品(pin)的(de)

OD 值由標(biao)準(zhun)(zhun)曲線(xian)查出相應的(de)(de)濃度；再乘以稀(xi)釋倍數；或用標(biao)準(zhun)(zhun)物的(de)(de)濃度與OD 值計算(suan)出標(biao)

準曲線(xian)的直線(xian)回(hui)歸方程式，將樣品的OD 值(zhi)代入方程式，計算出樣品濃度(du)，再乘(cheng)以(yi)稀釋倍數，

即為樣(yang)品的實際濃度。

六、注(zhu)意事(shi)項

1．試劑盒從冷藏環境中(zhong)取出應在室溫平衡15-30 分(fen)鐘后(hou)方可(ke)使用，酶標包被板開封后(hou)如未

用完(wan)，板條應裝入密封袋中(zhong)保(bao)存(cun)。

2．濃洗滌液可能(neng)會有結晶(jing)析出，稀釋時可在水(shui)浴(yu)中(zhong)加溫助溶(rong)，洗滌時不(bu)影響結果。

3．各(ge)步(bu)加樣(yang)均應使用加樣(yang)器，并經常校對其準(zhun)確性(xing)，以避免試驗(yan)誤(wu)差。一(yi)次(ci)加樣(yang)時間

控制在(zai)5 分鐘內，如標(biao)本數(shu)量(liang)多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次(ci)測(ce)定的同時做(zuo)標(biao)(biao)準(zhun)曲(qu)線，做(zuo)復孔(kong)。如(ru)標(biao)(biao)本中待測(ce)物質(zhi)含量過(guo)高（樣本OD 值

大于標準品(pin)(pin)孔*孔的(de)OD 值(zhi)），請(qing)先用樣品(pin)(pin)稀(xi)釋液稀(xi)釋一定倍數（n 倍）后(hou)再(zai)測定，計

算時請Zui后(hou)乘以總稀(xi)釋倍數（×n×5）。

5． 封(feng)板膜只限一(yi)次性使用，以避免交(jiao)叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說(shuo)明書的(de)操作進行，試驗(yan)結果判定(ding)必須以酶(mei)標儀(yi)讀(du)數為(wei)準(zhun).

8．所有樣品(pin)，洗滌液(ye)和各(ge)種(zhong)廢(fei)棄物(wu)都應按傳(chuan)染物(wu)處理。

9．本試劑不(bu)同(tong)批(pi)號組分不(bu)得混用(yong)。

七、特別提醒

1.標(biao)本采集后盡早進行(xing)提(ti)(ti)取，提(ti)(ti)取按相關文獻進行(xing)，提(ti)(ti)取后應(ying)盡快進行(xing)實驗。若不能

馬上進(jin)行試驗(yan)，可(ke)將標本放(fang)于-20℃保(bao)存，但(dan)應避(bi)免反復凍融

2.不能檢測(ce)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣(la)根過氧化物酶的（HRP）活性。

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