一、兔補體蛋白4（C4）ELISA試劑盒詳細(xi)介紹

中文名稱:兔補體蛋白4（C4）ELISA試劑盒

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:兔ELISA試劑(ji)盒

檢(jian)測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研，不得用于(yu)臨床診斷。

保存及有(you)效(xiao)期:2-8℃，六個月

檢測(ce)(ce)樣本(ben)種類:用于測(ce)(ce)定血(xue)清(qing)，血(xue)漿(jiang)及相(xiang)關液(ye)體等(deng)樣本(ben)的含量或者表(biao)達。例如適合檢測(ce)(ce)包括血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、尿(niao)液(ye)、胸腹水、灌洗液(ye)、腦脊液(ye)、細胞培養上清(qing)、組(zu)織勻漿(jiang)等(deng)標本(ben)。

臻科生物(wu)供(gong)應(ying)的種屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔(tu)子、昆(kun)蟲(chong)、豬牛羊(yang)、雞鴨鵝(e)、植物(wu)ELISA試(shi)劑盒等

二、實驗原(yuan)理(li)

本試(shi)劑盒(he)應用雙抗體(ti)(ti)(ti)(ti)夾心法測定標本中兔(tu)補(bu)(bu)體(ti)(ti)(ti)(ti)蛋(dan)白4(C4)水平。用純化(hua)的(de)(de)(de)(de)兔(tu)補(bu)(bu)體(ti)(ti)(ti)(ti)蛋(dan)白4(C4)抗體(ti)(ti)(ti)(ti)包(bao)(bao)被微孔(kong)(kong)板，制成(cheng)(cheng)固相抗體(ti)(ti)(ti)(ti)，往(wang)包(bao)(bao)被單抗的(de)(de)(de)(de)微孔(kong)(kong)中依次加(jia)入(ru)補(bu)(bu)體(ti)(ti)(ti)(ti)蛋(dan)白4(C4)，再(zai)與HRP 標記的(de)(de)(de)(de)補(bu)(bu)體(ti)(ti)(ti)(ti)蛋(dan)白4(C4)抗體(ti)(ti)(ti)(ti)結合，形成(cheng)(cheng)抗體(ti)(ti)(ti)(ti)-抗原-酶標抗體(ti)(ti)(ti)(ti)復合物，經過(guo)*洗滌后(hou)加(jia)底(di)物TMB 顯(xian)色(se)(se)。TMB 在(zai)HRP 酶的(de)(de)(de)(de)催化(hua)下(xia)轉化(hua)成(cheng)(cheng)藍色(se)(se)，并在(zai)酸的(de)(de)(de)(de)作用下(xia)轉化(hua)成(cheng)(cheng)Zui終的(de)(de)(de)(de)黃色(se)(se)。顏色(se)(se)的(de)(de)(de)(de)深淺和樣(yang)品(pin)中的(de)(de)(de)(de)補(bu)(bu)體(ti)(ti)(ti)(ti)蛋(dan)白4(C4)呈正相關。用酶標儀在(zai)450nm波長下(xia)測定吸(xi)光度（OD 值），通過(guo)標準曲線計算樣(yang)品(pin)中兔(tu)補(bu)(bu)體(ti)(ti)(ti)(ti)蛋(dan)白4(C4)濃度。

三、試劑(ji)盒組成

四(si)、操作(zuo)步驟

五(wu)、試(shi)劑盒計算

以標準(zhun)物的濃度為橫坐標，OD 值(zhi)為縱(zong)坐標，在坐標紙上繪出標準(zhun)曲(qu)線，根據(ju)樣品的

OD 值由標準曲線查出相應的濃(nong)度；再(zai)乘(cheng)以稀釋倍數；或用(yong)標準物的濃(nong)度與(yu)OD 值計算出標

準曲線的(de)直線回(hui)歸方程式，將樣(yang)品的(de)OD 值代入方程式，計算出樣(yang)品濃度，再乘以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)，

即為樣(yang)品的實際(ji)濃度。

六、注意事(shi)項(xiang)

1．試(shi)劑盒從冷(leng)藏環境中取出應(ying)在室溫平(ping)衡15-30 分(fen)鐘后(hou)方可(ke)使用，酶標包被(bei)板開封后(hou)如未

用完(wan)，板條應裝(zhuang)入密封袋中(zhong)保存。

2．濃洗滌液(ye)可能會有(you)結晶(jing)析出，稀(xi)釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影(ying)響結果。

3．各步加樣(yang)(yang)均應使(shi)用加樣(yang)(yang)器，并經常校對其準確(que)性，以避免(mian)試驗(yan)誤差。一次加樣(yang)(yang)時間

控制在5 分鐘內，如(ru)標(biao)本數量多，推薦使用(yong)排槍(qiang)加(jia)樣。

4． 請每次測(ce)定的同時做(zuo)標準曲線，做(zuo)復孔。如標本(ben)中待測(ce)物質含量過高（樣(yang)本(ben)OD 值(zhi)

大于(yu)標準品(pin)(pin)孔*孔的OD 值(zhi)），請先(xian)用樣(yang)品(pin)(pin)稀釋(shi)液稀釋(shi)一定倍數(shu)（n 倍）后再(zai)測定，計(ji)

算時請(qing)Zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜只限(xian)一次(ci)性使用，以避免交叉污染。

6．底(di)物請避光保存(cun)。

7．嚴格(ge)按照說(shuo)明書的操(cao)作進行，試(shi)驗結果判定(ding)必須以酶標(biao)儀(yi)讀數為準(zhun).

8．所有樣品，洗滌液和(he)各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

七、特別提醒

1.標(biao)本采(cai)集后盡(jin)早進(jin)行(xing)提(ti)(ti)取(qu)，提(ti)(ti)取(qu)按相關(guan)文獻(xian)進(jin)行(xing)，提(ti)(ti)取(qu)后應盡(jin)快進(jin)行(xing)實驗。若不能

馬上進行(xing)試驗，可將標本放(fang)于(yu)-20℃保存，但應(ying)避免(mian)反復凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣(yang)品，因NaN3 抑制辣根過氧化(hua)物酶(mei)的（HRP）活(huo)性。

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