一、中文名稱:昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)ELISA試劑盒

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種(zhong)屬:昆(kun)蟲ELISA試劑(ji)盒(he)

檢測波長:450 nm

所(suo)需(xu)樣本體積: 50ul

適用(yong)范圍:僅(jin)供(gong)科研(yan)，不得(de)用(yong)于臨床(chuang)診斷(duan)。

保(bao)存及有效期(qi):2-8℃，六個月

檢測樣本(ben)種類:用于測定血清，血漿(jiang)及相關(guan)液(ye)體(ti)等樣本(ben)的(de)含(han)量或者表達。例(li)如適合(he)檢測包括血清、血漿(jiang)、尿液(ye)、胸腹水、灌(guan)洗液(ye)、腦脊液(ye)、細胞培養上清、組織勻漿(jiang)等標本(ben)。

臻科生物(wu)供(gong)應的種屬有：昆(kun)(kun)蟲、大鼠、小鼠、豚鼠、兔(tu)子、昆(kun)(kun)蟲、豬牛(niu)羊、雞鴨鵝、植物(wu)ELISA試劑盒等(deng)。

二、實驗原理：

本試劑盒應用雙抗(kang)(kang)(kang)體夾心法測(ce)定標(biao)(biao)本中昆蟲蛻(tui)(tui)皮(pi)激(ji)(ji)素(su)(Ecdysone)水平。用純化的(de)(de)(de)(de)昆蟲蛻(tui)(tui)皮(pi)激(ji)(ji)素(su)(Ecdysone)抗(kang)(kang)(kang)體包(bao)被微孔(kong)板，制成(cheng)固相(xiang)抗(kang)(kang)(kang)體，往包(bao)被單抗(kang)(kang)(kang)的(de)(de)(de)(de)微孔(kong)中依(yi)次加(jia)入(ru)蛻(tui)(tui)皮(pi)激(ji)(ji)素(su)(Ecdysone)，再(zai)與HRP 標(biao)(biao)記的(de)(de)(de)(de)蛻(tui)(tui)皮(pi)激(ji)(ji)素(su)(Ecdysone)抗(kang)(kang)(kang)體結合(he)，形成(cheng)抗(kang)(kang)(kang)體-抗(kang)(kang)(kang)原-酶標(biao)(biao)抗(kang)(kang)(kang)體復合(he)物，經過(guo)*洗滌后加(jia)底物TMB 顯色(se)。TMB 在(zai)HRP 酶的(de)(de)(de)(de)催化下(xia)(xia)轉化成(cheng)藍色(se)，并在(zai)酸(suan)的(de)(de)(de)(de)作(zuo)用下(xia)(xia)轉化成(cheng)終的(de)(de)(de)(de)黃(huang)色(se)。顏色(se)的(de)(de)(de)(de)深淺和樣品中的(de)(de)(de)(de)蛻(tui)(tui)皮(pi)激(ji)(ji)素(su)(Ecdysone)呈正相(xiang)關。用酶標(biao)(biao)儀(yi)在(zai)450nm波長下(xia)(xia)測(ce)定吸光度（OD 值），通過(guo)標(biao)(biao)準曲線計算樣品中昆蟲蛻(tui)(tui)皮(pi)激(ji)(ji)素(su)(Ecdysone)濃度。

三、試劑盒組成：

四、操作步驟：

準備(bei)試劑，樣(yang)品和標準品

加(jia)入準(zhun)備好的樣品和標準(zhun)品，37℃反應(ying)30分鐘

洗板5次，加入(ru)酶標試劑，37℃反應30分鐘

洗板5次，加入顯(xian)色A、B,37℃顯(xian)色10分鐘

加入終止液

15分鐘之(zhi)內讀OD值

后計算

五、試劑盒計算：

以(yi)標準(zhun)(zhun)物的濃(nong)(nong)度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準(zhun)(zhun)曲線，根據樣品(pin)的OD 值由標準(zhun)(zhun)曲線查出相(xiang)應的濃(nong)(nong)度；再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍數(shu)；或用標準(zhun)(zhun)物的濃(nong)(nong)度與OD 值計算出標準(zhun)(zhun)曲線的直線回歸方(fang)程(cheng)式(shi)，將(jiang)樣品(pin)的OD 值代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi)，計算出樣品(pin)濃(nong)(nong)度，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍數(shu)，即為樣品(pin)的實際濃(nong)(nong)度。

六、注意事項：

1．試(shi)劑盒從冷藏環境中取(qu)出應(ying)在室溫平(ping)衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完(wan)，板條應(ying)裝(zhuang)入(ru)密封袋中保存。

2．濃洗滌(di)液可能會有結晶析(xi)出，稀釋時(shi)可在水浴中加溫助(zhu)溶(rong)，洗滌(di)時(shi)不影響結果。

3．各步加(jia)樣(yang)均應使用加(jia)樣(yang)器，并(bing)經(jing)常校對其準確性，以(yi)避免試驗誤差。一(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時間控制(zhi)在(zai)5 分鐘內，如標本數量多(duo)，推薦使用排(pai)槍(qiang)加(jia)樣(yang)。

4． 請(qing)每次測定(ding)(ding)的(de)同時做標準曲(qu)線，做復孔。如(ru)標本中待(dai)測物質含量過高（樣(yang)(yang)本OD 值大于標準品孔di一孔的(de)OD 值），請(qing)先用樣(yang)(yang)品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)一定(ding)(ding)倍數（n 倍）后(hou)(hou)再測定(ding)(ding)，計算(suan)時請(qing)后(hou)(hou)乘以總(zong)稀(xi)釋(shi)倍數（×n×5）。

5． 封板膜只(zhi)限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明(ming)書的操作進行，試驗結果判定必須以酶(mei)標儀讀數(shu)為(wei)準.

8．所有樣(yang)品，洗滌液和各種廢棄物都(dou)應按傳染物處理。

9．本試劑不同(tong)批(pi)號組分不得混(hun)用(yong)。

七．特別提醒：

1.標(biao)本(ben)采集(ji)后(hou)盡早(zao)進行(xing)(xing)提取，提取按相關文獻(xian)進行(xing)(xing)，提取后(hou)應盡快進行(xing)(xing)實驗(yan)。若不(bu)能馬上(shang)進行(xing)(xing)試驗(yan)，可(ke)將標(biao)本(ben)放于(yu)-20℃保存(cun)，但(dan)應避免反復凍融(rong)。

2.不能檢測含NaN3 的(de)樣(yang)品，因NaN3 抑(yi)制辣根(gen)過氧化物酶的(de)（HRP）活性。