描述:人肺癌標志(zhi)物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒操作(zuo)簡單、結果(guo)精(jing)確,臻科(ke)生物從(cong)業(ye)多年一直(zhi)專心致力于(yu)免疫學技(ji)術的(de)(de)積累與發展,以其優質(zhi)的(de)(de)產品質(zhi)量與專業(ye)的(de)(de)技(ji)術服務,贏得業(ye)內廣大人士的(de)(de)認可。我(wo)司(si)也一直(zhi)和國內外眾多高等院(yuan)校與科(ke)研單位保持良好(hao)的(de)(de)合作(zuo)關系,共同(tong)努力合作(zuo)共贏。
一(yi)、人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒詳細(xi)介紹(shao)
中文名稱:人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒
規格(ge): 48T /96T
品牌:臻科(ke)生物
種屬:人ELISA試劑盒
檢測波(bo)長:450 nm
所需樣本體積(ji): 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于(yu)臨床診斷。
保存(cun)及有效期:2-8℃,六個月
檢(jian)測樣本(ben)種類:用于(yu)測(ce)定血清,血漿(jiang)及(ji)相(xiang)關液體(ti)等樣(yang)本的含量或者表達(da)。例如適合(he)檢測包括血(xue)清(qing)、血(xue)漿、尿液(ye)、胸腹水、灌洗液(ye)、腦(nao)脊液(ye)、細胞培養上清(qing)、組織勻漿等(deng)標本(ben)。
臻科生物(wu)供(gong)應的種屬有(you):人(ren)、大鼠(shu)、小鼠(shu)、豚鼠(shu)、兔子、人(ren)、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑(ji)盒等
二、實驗原理
本試(shi)劑盒(he)應(ying)用(yong)雙抗體夾心(xin)法測定標本中人肺癌標志(zhi)物(wu)DR-70(DR-70TM)水平。用純(chun)化的人肺癌(ai)標志物DR-70(DR-70TM)抗(kang)(kang)體(ti)包被微(wei)孔板,制成固相抗(kang)(kang)體(ti),往包被單抗(kang)(kang)的微(wei)孔中(zhong)依次加入肺癌標志物DR-70(DR-70TM),再與HRP 標記的(de)肺癌標(biao)志物DR-70(DR-70TM)抗體(ti)結合,形成抗體(ti)-抗原-酶標抗體(ti)復合物,經(jing)過*洗滌后加底物TMB 顯色(se)(se)。TMB 在HRP 酶的(de)(de)催化下轉化成藍色(se)(se),并在酸的(de)(de)作(zuo)用下轉化成終的(de)(de)黃色(se)(se)。顏色(se)(se)的(de)(de)深淺(qian)和樣品中(zhong)的(de)(de)肺癌標志物DR-70(DR-70TM)呈正相關。用(yong)酶標儀在450nm波長下(xia)測定吸(xi)光度(OD 值),通過標準曲(qu)線計算樣品(pin)中(zhong)人肺癌(ai)標志物DR-70(DR-70TM)濃(nong)度。
三、試劑(ji)盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止(zhi)液(ye) | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶(mei)標試(shi)劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準(zhun)品(pin)(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包(bao)被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品(pin)稀釋液 | 6ml×1 瓶(ping) | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑(ji)A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封(feng)板膜 | 2 張(zhang) |
6 | 顯(xian)色(se)劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四、操作步(bu)驟(zou)
準(zhun)備試劑,樣品和標準(zhun)品
加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分(fen)鐘
洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應(ying)30分(fen)鐘
洗板(ban)5次,加(jia)入(ru)顯色A、B,37℃顯色10分(fen)鐘
加入終止(zhi)液
15分鐘之內讀OD值
后計(ji)算
五、試劑盒計算
以標(biao)準物的濃度為橫坐(zuo)標(biao),OD 值為縱坐(zuo)標(biao),在坐(zuo)標(biao)紙上繪出標(biao)準曲線,根(gen)據樣品的
OD 值(zhi)由標準(zhun)曲線(xian)查出相應的濃度;再乘以稀(xi)釋倍數;或(huo)用(yong)標準(zhun)物的濃度與OD 值(zhi)計算(suan)出標
準曲線(xian)的直線(xian)回歸方(fang)程(cheng)式(shi),將樣(yang)品的OD 值代入方(fang)程(cheng)式(shi),計算出樣(yang)品濃度,再乘以稀釋(shi)倍(bei)數,
即為樣(yang)品的實(shi)際濃(nong)度(du)。
六、注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huan)境中取出(chu)應(ying)在室溫(wen)平衡(heng)15-30 分鐘后(hou)方(fang)可使用(yong),酶標包被板開封后(hou)如未
用完,板條應(ying)裝(zhuang)入密封袋中保存(cun)。
2.濃(nong)洗(xi)滌液可能會(hui)有結(jie)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助(zhu)溶,洗(xi)滌時不影響結(jie)果。
3.各步加樣(yang)均(jun)應(ying)使用加樣(yang)器(qi),并經(jing)常校對其準確(que)性(xing),以(yi)避免試(shi)驗(yan)誤差。一次加樣(yang)時間
控制在5 分鐘內,如標本數量(liang)多,推薦使用排(pai)槍加樣。
4. 請每次測(ce)定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待(dai)測物質含量過高(gao)(樣(yang)本OD 值
大于(yu)標準品孔di一孔的OD 值(zhi)),請先用樣品稀釋(shi)液稀釋(shi)一定倍數(n 倍)后再測定,計
算(suan)時請(qing)后乘以總(zong)稀釋倍數(×n×5)。
5. 封(feng)板膜只限一次性使(shi)用,以避免(mian)交叉污染。
6.底物(wu)請避光保存。
7.嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明書的操作進行,試(shi)驗(yan)結果判定必(bi)須以酶標儀讀數為準.
8.所有(you)樣品,洗滌液和(he)各種廢(fei)棄(qi)物(wu)都應按傳染物(wu)處(chu)理。
9.本試劑(ji)不同批號組分不得混(hun)用(yong)。
七.特別提醒
1.標本采(cai)集后盡早進(jin)行提取(qu),提取(qu)按(an)相關文(wen)獻進(jin)行,提取(qu)后應(ying)盡快進(jin)行實驗(yan)。若不能
馬上進行(xing)試(shi)驗(yan),可將標(biao)本(ben)放(fang)于-20℃保存,但應(ying)避(bi)免反復凍融(rong)
2.不(bu)能檢測含NaN3 的樣(yang)品(pin),因NaN3 抑制辣根過氧化物(wu)酶的(HRP)活性。