一(yi)、人(ren)兒茶酚(fen)胺（CA）ELISA試劑盒詳(xiang)細介紹

中文名稱:人兒茶(cha)酚胺（CA）ELISA試(shi)劑盒

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物(wu)

種屬:人ELISA試劑盒

檢測波長(chang):450 nm

所需(xu)樣本(ben)體積: 50ul

適用(yong)(yong)范圍(wei):僅供科研，不(bu)得用(yong)(yong)于臨床診斷。

保存及(ji)有效期:2-8℃，六(liu)個月

檢測樣本(ben)(ben)種類:用于(yu)測定血(xue)(xue)清(qing)，血(xue)(xue)漿及相關液體(ti)等樣本(ben)(ben)的含量或者表(biao)達。例如適合檢測包(bao)括血(xue)(xue)清(qing)、血(xue)(xue)漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦(nao)脊液、細胞培養(yang)上清(qing)、組織勻漿等標本(ben)(ben)。

臻科生物供應(ying)的種屬有：人(ren)、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人(ren)、豬牛(niu)羊、雞鴨鵝、植物ELISA試(shi)劑盒等(deng)

二、實驗原理

本試劑盒應用雙(shuang)抗(kang)體夾(jia)心(xin)法測定標本中人兒茶酚胺（CA）水平。用純化的人兒茶酚胺（CA）抗體包(bao)被微孔板，制(zhi)成(cheng)固(gu)相抗體，往包(bao)被單抗的微孔中依次加入兒茶酚胺(an)（CA），再與HRP 標記的兒茶酚胺（CA）抗(kang)體結合(he)，形成(cheng)抗(kang)體-抗(kang)原(yuan)-酶(mei)標(biao)抗(kang)體復(fu)合(he)物，經過*洗滌后(hou)加(jia)底物TMB 顯(xian)色(se)(se)。TMB 在(zai)HRP 酶(mei)的(de)(de)催化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍色(se)(se)，并(bing)在(zai)酸的(de)(de)作用下轉化(hua)成(cheng)黃色(se)(se)。顏(yan)色(se)(se)的(de)(de)深(shen)淺和樣(yang)品中(zhong)的(de)(de)兒茶酚胺（CA）呈正相關。用酶(mei)標儀(yi)在450nm波(bo)長下測(ce)定吸光(guang)度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中人兒茶酚胺（CA）濃度(du)。

三、試劑盒(he)組成

四、操(cao)作步(bu)驟(zou)

1. 標(biao)準(zhun)品(pin)的稀(xi)釋(shi)(shi)：本試劑盒提供原倍標(biao)準(zhun)品(pin)一支，用戶可按照下列圖表(biao)在小試管中進行稀(xi)釋(shi)(shi)。

2.加樣(yang)(yang)(yang)：分別設(she)空白孔(kong)（空白對(dui)照孔(kong)不加樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)及酶(mei)標(biao)試劑(ji)，其(qi)余(yu)各步操作相同）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)孔(kong)。在酶(mei)標(biao)包被板(ban)(ban)上標(biao)準(zhun)品(pin)(pin)(pin)準(zhun)確加樣(yang)(yang)(yang)50μl，待(dai)測樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)孔(kong)中先加樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)稀(xi)釋液40μl，然(ran)后再加待(dai)測樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)10μl（樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)終稀(xi)釋度為5倍）。加樣(yang)(yang)(yang)將樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)加于酶(mei)標(biao)板(ban)(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量不觸及孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃動混勻。

3.溫(wen)育：用封板膜封板后置37℃溫(wen)育30分(fen)鐘。   

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾(liu)水30倍稀釋后備用

5.洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭掉封板膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體，甩干，每孔加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，靜置30秒(miao)后棄(qi)去，如此重(zhong)復5次，拍干。

6.加酶：每孔(kong)加入酶標試劑(ji)50μl，空白孔(kong)除外。

7.溫(wen)育：操作同3。

8.洗滌(di)：操(cao)作同5。

9.顯色(se)(se)：每孔先加入顯色(se)(se)劑A50μl，再加入顯色(se)(se)劑B50μl，輕輕震蕩混勻(yun)，37℃避(bi)光顯色(se)(se)10分鐘.

10.終(zhong)止(zhi)(zhi)：每孔加終(zhong)止(zhi)(zhi)液(ye)50μl，終(zhong)止(zhi)(zhi)反應（此(ci)時(shi)藍色立轉(zhuan)黃色）。

11.測定：以空(kong)白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光(guang)度(du)（OD值）。 測定應在加終止液(ye)后15分鐘以內進行。

五、試劑盒計算

以標(biao)(biao)(biao)準(zhun)物(wu)的濃(nong)度為(wei)橫坐標(biao)(biao)(biao)，OD 值為(wei)縱(zong)坐標(biao)(biao)(biao)，在坐標(biao)(biao)(biao)紙上(shang)繪出標(biao)(biao)(biao)準(zhun)曲線(xian)，根據樣品的

OD 值由(you)標(biao)準曲線(xian)查出(chu)相應的(de)濃度；再乘以稀釋倍數；或用(yong)標(biao)準物的(de)濃度與OD 值計算出(chu)標(biao)

準曲線(xian)的直線(xian)回歸方程式，將樣品的OD 值代(dai)入方程式，計(ji)算出樣品濃度，再(zai)乘以稀釋倍(bei)數(shu)，

即(ji)為樣(yang)品的實(shi)際濃度。

六(liu)、注意事項(xiang)

1．試劑盒從冷(leng)藏環境(jing)中取出應在室(shi)溫(wen)平衡15-30 分鐘后(hou)方可使(shi)用，酶標包被板開(kai)封(feng)后(hou)如未

用完，板條應裝(zhuang)入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jie)晶析出(chu)，稀釋時可在水(shui)浴中(zhong)加溫助(zhu)溶，洗滌時不影(ying)響(xiang)結(jie)果。

3．各步加(jia)樣(yang)(yang)(yang)均應使用加(jia)樣(yang)(yang)(yang)器，并(bing)經常(chang)校對其準(zhun)確性，以(yi)避(bi)免試驗誤差。一次加(jia)樣(yang)(yang)(yang)時(shi)間

控制(zhi)在5 分(fen)鐘內，如(ru)標本(ben)數量多，推(tui)薦使用(yong)排槍加(jia)樣。

4．請每次測(ce)定的同時做標(biao)(biao)準曲(qu)線，做復孔。如標(biao)(biao)本中待測(ce)物質含量過高（樣本OD 值

大于標準品孔di一(yi)孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一(yi)定倍數（n 倍）后再測定，計

算(suan)時請(qing)后乘以(yi)總稀釋倍數（×n×5）。

5．封板膜(mo)只限一(yi)次性使用，以(yi)避免(mian)交叉污染。

6．底物請避光(guang)保存。

7．嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書的(de)操作進(jin)行(xing)，試(shi)驗結(jie)果判定必須以酶標(biao)儀讀數為(wei)準.

8．所有樣(yang)品，洗滌(di)液和各種廢棄物都應按傳(chuan)染物處理。

9．本試劑不(bu)(bu)同批號組分(fen)不(bu)(bu)得混(hun)用。

七．特別提醒(xing)

1.標(biao)本采(cai)集后盡(jin)早進行(xing)提取，提取按相關文獻進行(xing)，提取后應盡(jin)快進行(xing)實驗。若不能

馬上進行試(shi)驗，可將標本放于-20℃保(bao)存，但應避免反復凍(dong)融

2.不(bu)能檢測含(han)NaN3 的樣品(pin)，因(yin)NaN3 抑制辣根過氧化物酶(mei)的（HRP）活性。

八．更(geng)多優勢(shi)產品

ZK-03023 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑(ji)盒

ZK-03024 小鼠瘦素(su)(LEP)ELISA試劑盒

ZK-03025 小鼠FMS樣酪(lao)氨酸激(ji)酶(mei)3配體(ti)(Flt3L)ELISA試劑盒

ZK-03026 小(xiao)鼠(shu)白介(jie)素10(IL-10)ELISA試劑盒(he)

ZK-03027 小(xiao)鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒

ZK-03028 小鼠糖(tang)蛋(dan)白130(gp130)ELISA試劑盒

ZK-03029 小鼠白(bai)介素11(IL-11)ELISA試劑盒

ZK-03030 小鼠巨噬細胞炎性(xing)蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑(ji)盒

ZK-03040 小(xiao)鼠磷(lin)脂酰(xian)絲氨(an)酸(suan)(PS)ELISA試(shi)劑盒

ZK-03041 小鼠(shu)β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒

ZK-03042 小鼠鑰孔蟲戚(qi)血(xue)藍(lan)蛋(dan)白(KLH)ELISA試(shi)劑盒

ZK-03043 小鼠膽堿磷(lin)酸甘油(you)酯(zhi)(PC/CPG)ELISA試劑盒

ZK-03044 小鼠乳(ru)酸脫(tuo)氫酶(LDH)ELISA試劑盒

ZK-03045 小(xiao)鼠(shu)解(jie)整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒

ZK-03046 小鼠Ⅰ型膠原交(jiao)聯羧(suo)基末(mo)端(duan)肽(ⅠCTP)ELISA試劑(ji)盒

ZK-03047 小鼠抗(kang)紅細(xi)胞抗(kang)體(RBC)ELISA試劑盒

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ZK-03049 小鼠神經絲蛋白(NF)ELISA試(shi)劑盒

ZK-03050 小(xiao)鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑(ji)盒

ZK-03051 小鼠(shu)還原(yuan)型谷胱甘肽(GSH)ELISA試(shi)劑盒