磷(lin)酸腺苷(AMP)含量試劑(ji)盒HPLC法
磷酸腺苷(AMP)含量試劑盒HPLC法
規(gui)格(ge) : 50T/100T
測試方法:高效液相色譜法/HPLC
測定意義
磷(lin)(lin)(lin)酸腺苷(gan)(AMP)由一(yi)分子腺嘌(piao)呤、一(yi)分子核糖組(zu)成(cheng)的(de)腺苷(gan),以及一(yi)分子磷(lin)(lin)(lin)酸組(zu)成(cheng)。是在機體內由ATP與ADP釋放能量之后形(xing)成(cheng)的(de)。可以繼續(xu)結合磷(lin)(lin)(lin)酸基團形(xing)成(cheng)二(er)磷(lin)(lin)(lin)酸腺苷(gan)(ADP)和三磷(lin)(lin)(lin)酸腺苷(gan)(ATP)。AMP廣泛存在于(yu)動物(wu)(wu)、植物(wu)(wu)、微生(sheng)物(wu)(wu)和培養細(xi)胞中,是描述細(xi)胞能量代(dai)謝狀態的(de)主要(yao)參數。測定(ding)AMP含量并且計算能荷,能夠反映能量代(dai)謝狀態。
測定原理(li)
AMP在254 nm下有(you)吸收峰,可以利用高(gao)效液(ye)相色譜法測定其含量。
高效液(ye)相色(se)譜法簡介:
高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)法(fa)(High Performance Liquid Chromatography HPLC)又稱“高壓(ya)(ya)液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)”、“高速(su)液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)”、“高分離(li)(li)度液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)”、“近代柱(zhu)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)”等。高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)是色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)法(fa)的(de)(de)(de)一(yi)個重要分支,以液(ye)(ye)體為流(liu)動(dong)相(xiang),采用(yong)高壓(ya)(ya)輸液(ye)(ye)系統,將具有(you)不同極(ji)性的(de)(de)(de)單一(yi)溶劑或不同比例的(de)(de)(de)混合溶劑、緩(huan)沖液(ye)(ye)等流(liu)動(dong)相(xiang)泵入(ru)裝有(you)固(gu)定相(xiang)的(de)(de)(de)色(se)譜(pu)(pu)(pu)(pu)柱(zhu),在柱(zhu)內各成分被分離(li)(li)后(hou),進(jin)入(ru)檢測器進(jin)行檢測,從而實現對試樣的(de)(de)(de)分析。該方法(fa)已成為化(hua)學、醫學、工業、農學、商(shang)檢和法(fa)檢等學科領域中重要的(de)(de)(de)分離(li)(li)分析技術應用(yong) 。
高效(xiao)液相色(se)譜法具有“四高一(yi)廣”的特點:
①高壓:流動相為液體,流經色譜(pu)柱時,受(shou)到的阻力(li)較大,為了能迅速通過色譜(pu)柱,必須對(dui)載液加(jia)高壓。
②高速:分(fen)析(xi)速度快(kuai)、載(zai)液(ye)流速快(kuai),較(jiao)經典液(ye)體色譜法速度快(kuai)得多,通常分(fen)析(xi)一個(ge)樣品在15~30分(fen)鐘(zhong),有些樣品甚至在5分(fen)鐘(zhong)內即(ji)可完成,一般(ban)小(xiao)于1小(xiao)時。
③高效:分離效能高。可選擇固定相(xiang)和流動相(xiang)以(yi)達到很好的分離(li)效果,比工業精餾(liu)塔(ta)和氣相色譜的分離(li)效能高出許多倍。
④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量(liang)在μL數量(liang)級。
⑤應用(yong)范圍廣:百分(fen)之七十以上的(de)有機(ji)化合物可用(yong)高(gao)效液相(xiang)色譜分(fen)析,特別是高(gao)沸點、大分(fen)子(zi)、強極性、熱穩定(ding)性差化合物的(de)分(fen)離分(fen)析,顯示出(chu)優勢。
⑥柱子可(ke)反(fan)復使用:用一根(gen)柱子可(ke)分離(li)不同化(hua)合物(wu)
⑦樣品(pin)量少、容易回(hui)收(shou):樣品(pin)經過色(se)譜柱后不(bu)被(bei)破壞,可(ke)以收(shou)集(ji)單一組(zu)分(fen)或做(zuo)制備。
此(ci)外(wai)高(gao)效液相色(se)譜(pu)還(huan)有色(se)譜(pu)柱可反(fan)復使用、樣品不(bu)被破(po)壞、易回收等優(you)點。
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