一、牛嗜酸粒細胞趨化因子（ECF）ELISA試劑盒詳細(xi)介(jie)紹

中文名稱:牛嗜酸粒細胞趨化因子（ECF）ELISA試劑盒

規格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種(zhong)屬:牛ELISA試劑盒(he)

檢測波長:450 nm

所需樣本體(ti)積(ji): 50ul

適(shi)用范圍:僅供科(ke)研，不得(de)用于臨床診斷(duan)。

保存及有效期:2-8℃，六個月

檢測樣本(ben)(ben)種類:用于測定牛血(xue)清(qing)，血(xue)漿及相(xiang)關液體等(deng)樣本(ben)(ben)的含量或(huo)者表達。例如適合檢測包括血(xue)清(qing)、血(xue)漿、尿液、胸腹水、灌(guan)洗液、腦脊液、細胞培養上清(qing)、組織勻漿等(deng)標本(ben)(ben)。

臻科生物供(gong)應的(de)種屬(shu)有：人、大鼠(shu)(shu)(shu)、小鼠(shu)(shu)(shu)、豚鼠(shu)(shu)(shu)、兔子、昆蟲、豬牛羊(yang)、雞鴨鵝、植(zhi)物ELISA試劑盒等

二(er)、實驗(yan)原理

本試劑(ji)盒應(ying)用雙抗體(ti)(ti)夾心法測定(ding)標(biao)本中(zhong)牛(niu)嗜酸(suan)(suan)(suan)粒(li)細(xi)胞趨(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子(ECF)水平。用純化(hua)(hua)(hua)的(de)(de)牛(niu)嗜酸(suan)(suan)(suan)粒(li)細(xi)胞趨(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子(ECF)抗體(ti)(ti)包被微(wei)孔板，制成(cheng)(cheng)固(gu)相抗體(ti)(ti)，往包被單(dan)抗的(de)(de)微(wei)孔中(zhong)依次(ci)加(jia)入嗜酸(suan)(suan)(suan)粒(li)細(xi)胞趨(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子(ECF)，再與HRP 標(biao)記的(de)(de)嗜酸(suan)(suan)(suan)粒(li)細(xi)胞趨(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子(ECF)抗體(ti)(ti)結合，形成(cheng)(cheng)抗體(ti)(ti)-抗原-酶標(biao)抗體(ti)(ti)復合物，經過*洗(xi)滌(di)后加(jia)底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的(de)(de)催化(hua)(hua)(hua)下轉化(hua)(hua)(hua)成(cheng)(cheng)藍色，并在酸(suan)(suan)(suan)的(de)(de)作用下轉化(hua)(hua)(hua)成(cheng)(cheng)Zui終(zhong)的(de)(de)黃色。顏色的(de)(de)深(shen)淺和樣品中(zhong)的(de)(de)嗜酸(suan)(suan)(suan)粒(li)細(xi)胞趨(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子(ECF)呈正相關。用酶標(biao)儀在450nm波長(chang)下測定(ding)吸(xi)光度（OD 值），通過標(biao)準曲線計算樣品中(zhong)牛(niu)嗜酸(suan)(suan)(suan)粒(li)細(xi)胞趨(qu)(qu)化(hua)(hua)(hua)因(yin)(yin)子(ECF)濃度。

三、試劑(ji)盒組成(cheng)

四、操作步(bu)驟

五、試劑盒計算

以(yi)標(biao)準物的(de)濃度為橫坐(zuo)(zuo)標(biao)，OD 值為縱(zong)坐(zuo)(zuo)標(biao)，在坐(zuo)(zuo)標(biao)紙(zhi)上繪(hui)出標(biao)準曲線，根據樣品(pin)的(de)

OD 值由標(biao)(biao)準曲線查出(chu)相應的濃度；再乘以(yi)稀釋倍數；或用標(biao)(biao)準物的濃度與OD 值計(ji)算出(chu)標(biao)(biao)

準曲(qu)線(xian)的直線(xian)回(hui)歸方(fang)程(cheng)(cheng)式(shi)，將樣品的OD 值代入(ru)方(fang)程(cheng)(cheng)式(shi)，計算出樣品濃度(du)，再(zai)乘以稀釋(shi)倍數，

即為樣(yang)品的實際(ji)濃度。

六、注(zhu)意事項

1．試劑盒從冷藏(zang)環境中取出應在室溫平(ping)衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被(bei)板(ban)開封(feng)后如未

用完，板條應(ying)裝入(ru)密封袋中保存(cun)。

2．濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可能會(hui)有結(jie)晶析出，稀(xi)釋時可在水(shui)浴中加溫助溶(rong)，洗(xi)滌時不影響(xiang)結(jie)果(guo)。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準(zhun)確性，以(yi)避免試驗(yan)誤差。一次加樣時間

控制(zhi)在5 分鐘內，如標本數(shu)量多(duo)，推薦(jian)使用排槍加樣(yang)。

4． 請(qing)每次測定的同時做標準曲(qu)線，做復孔。如標本(ben)(ben)中待測物質含量過高（樣本(ben)(ben)OD 值(zhi)

大于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀(xi)釋液稀(xi)釋一定倍(bei)數（n 倍(bei)）后(hou)再測定，計

算(suan)時請Zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避(bi)免交(jiao)叉污染。

6．底(di)物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操(cao)作進行，試驗結(jie)果判定必(bi)須以酶標儀讀數為(wei)準.

8．所有樣品(pin)，洗滌(di)液和各種廢棄物都(dou)應按傳(chuan)染物處理。

9．本試(shi)劑(ji)不同批號組分不得混(hun)用。

七、特別提醒

1.標本采集(ji)后盡(jin)早進行(xing)提取(qu)(qu)，提取(qu)(qu)按(an)相(xiang)關文獻進行(xing)，提取(qu)(qu)后應(ying)盡(jin)快進行(xing)實驗。若不能(neng)

馬上進行試驗(yan)，可將(jiang)標本放于-20℃保存(cun)，但應避免反復(fu)凍融(rong)

2.不能檢(jian)測(ce)含(han)NaN3 的(de)樣(yang)品，因(yin)NaN3 抑制(zhi)辣根過氧化(hua)物(wu)酶的(de)（HRP）活性。

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