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大鼠3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶試劑盒

描述:大(da)鼠3-羥基3-甲(jia)基戊(wu)二酰輔酶A還原酶試劑(ji)盒操作簡單(dan)、結果準確,臻科生物從業(ye)多年(nian)一直(zhi)專心致力于免(mian)疫學技(ji)術的(de)(de)積累與發展,以其優質的(de)(de)產品質量與專業(ye)的(de)(de)技(ji)術服務,贏得(de)業(ye)內廣大(da)人士的(de)(de)認可。我司(si)也(ye)一直(zhi)和國內外眾多高等院校與科研單(dan)位保持(chi)良好(hao)的(de)(de)合作關系(xi),共同(tong)努(nu)力合作共贏。

更新時間:2023-07-10
產品型號:
廠商性質:生產廠家
詳情介紹

一、大鼠3-羥基3-甲基戊二酰輔酶(mei)(mei)A還原酶(mei)(mei)試劑(ji)盒

中文(wen)名(ming)稱:大鼠3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶試劑(ji)盒(he)

規格(ge): 48T /96T

品牌:臻科生(sheng)物

種屬:大鼠ELISA試劑(ji)盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研,不得用于臨(lin)床(chuang)診斷(duan)。

保存(cun)及有效期:2-8℃,六個月

檢測(ce)樣本種類:用于測(ce)定血清(qing),血漿(jiang)及(ji)相關液體(ti)等樣本的含量(liang)或者(zhe)表(biao)達。例如適合(he)檢測(ce)包括(kuo)血清(qing)、血漿(jiang)、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊(ji)液、細胞培養(yang)上(shang)清(qing)、組織勻(yun)漿(jiang)等標本。

臻科生物供應的種屬有:人(ren)、大鼠(shu)(shu)、小鼠(shu)(shu)、豚鼠(shu)(shu)、兔子、人(ren)、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試(shi)劑盒(he)等

二、實驗原理

本試(shi)劑盒(he)應用雙抗體夾心(xin)法測定標本中大鼠(shu)3-羥基(ji)3-甲(jia)基(ji)戊二酰(xian)輔酶A還(huan)原酶水平。用純化的(de)大(da)鼠(shu)3-羥基3-甲(jia)基戊二(er)酰輔酶(mei)(mei)A還(huan)原酶(mei)(mei)抗體(ti)包被微(wei)孔(kong)板(ban),制(zhi)成固相抗體(ti),往(wang)包被單(dan)抗的微(wei)孔(kong)中(zhong)依次加(jia)大(da)鼠3-羥基3-甲(jia)基戊二酰輔酶(mei)A還原酶(mei),再(zai)與HRP 標記的3-羥(qian)基3-甲基戊二酰輔(fu)酶A還原(yuan)酶抗體結合,形(xing)成(cheng)抗體-抗原-酶(mei)標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色(se)。TMB 在(zai)HRP 酶(mei)的(de)(de)催化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍色(se),并(bing)在(zai)酸的(de)(de)作用下轉化(hua)成(cheng)終的(de)(de)黃色(se)。顏色(se)的(de)(de)深淺和樣品(pin)中的(de)(de)3-羥基(ji)(ji)3-甲基(ji)(ji)戊(wu)二酰輔酶(mei)A還原酶(mei)呈正相關。用(yong)酶(mei)標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中大(da)鼠3-羥基3-甲基戊二酰輔酶(mei)A還原酶(mei)濃度。

三、試劑盒組成

1

30 倍濃縮洗(xi)滌(di)液

20ml×1 瓶

7

終止(zhi)液

6ml×1 瓶

2

酶標試(shi)劑

6ml×1 瓶

8

標準品(pin)(240 pmol/L)

0.5ml×1 瓶(ping)

3

酶(mei)標包被(bei)板

12 孔×8 條

9

標(biao)準品稀釋液

1.5ml×1 瓶

4

樣品(pin)稀釋液

6ml×1 瓶

10

說明書

1 份(fen)

5

顯色劑(ji)A 液

6ml×1 瓶

11

封(feng)板膜

2 張

6

顯色劑 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 個

 

 

四(si)、操(cao)作步驟(zou)

1.標準品的(de)稀釋:本(ben)試劑盒提供(gong)原倍標準品一支,用(yong)戶(hu)可按照下列(lie)圖表在小試管中進行稀釋。

5號標準(zhun)品

150μl的(de)原(yuan)倍(bei)標準(zhun)品加入150μl標準(zhun)品稀釋液

4號(hao)標準(zhun)品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋(shi)液

3號標準品(pin)

150μl的4號(hao)標(biao)準(zhun)品(pin)加入150μl標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液

2號(hao)標(biao)準(zhun)品

150μl的(de)3號標準品加入150μl標準品稀釋(shi)液

1號(hao)標準品

150μl的2號標準(zhun)(zhun)品(pin)加(jia)入150μl標準(zhun)(zhun)品(pin)稀釋液

 

2.加(jia)(jia)樣(yang)(yang):分(fen)別設空(kong)白孔(空(kong)白對照孔不加(jia)(jia)樣(yang)(yang)品(pin)及酶(mei)標(biao)(biao)試劑,其余(yu)各步操作相同)、標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)孔、待(dai)測樣(yang)(yang)品(pin)孔。在(zai)酶(mei)標(biao)(biao)包被板(ban)上標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)準(zhun)(zhun)確加(jia)(jia)樣(yang)(yang)50μl,待(dai)測樣(yang)(yang)品(pin)孔中先(xian)加(jia)(jia)樣(yang)(yang)品(pin)稀釋液40μl,然后再加(jia)(jia)待(dai)測樣(yang)(yang)品(pin)10μl(樣(yang)(yang)品(pin)終(zhong)稀釋度為5倍(bei))。加(jia)(jia)樣(yang)(yang)將樣(yang)(yang)品(pin)加(jia)(jia)于(yu)酶(mei)標(biao)(biao)板(ban)孔底部(bu),盡量不觸及孔壁,輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)晃動混勻。

3.溫育:用封(feng)板膜(mo)封(feng)板后置37℃溫育30分鐘。   

4.配液(ye):將30倍(bei)濃(nong)縮洗滌液(ye)用蒸(zheng)餾水30倍(bei)稀釋后備(bei)用

5.洗(xi)滌:小心揭掉封板膜,棄(qi)去液體,甩干,每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌液,靜置30秒后棄(qi)去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔(kong)加入酶標試(shi)劑50μl,空白孔(kong)除外。

7.溫育:操作(zuo)同(tong)3。

8.洗滌:操(cao)作同5。

9.顯(xian)(xian)(xian)色(se):每孔先加入(ru)顯(xian)(xian)(xian)色(se)劑A50μl,再(zai)加入(ru)顯(xian)(xian)(xian)色(se)劑B50μl,輕(qing)輕(qing)震蕩混勻,37℃避光顯(xian)(xian)(xian)色(se)10分鐘.

10.終(zhong)止:每孔(kong)加(jia)終(zhong)止液50μl,終(zhong)止反應(ying)(此時(shi)藍色立(li)轉黃(huang)色)。

11.測定:以空白孔調零,450nm波長(chang)依(yi)序測量各(ge)孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止(zhi)液后15分(fen)鐘以內進行。

五、試劑盒(he)計(ji)算

以標(biao)(biao)準物(wu)的濃度為(wei)橫坐(zuo)(zuo)標(biao)(biao),OD 值為(wei)縱(zong)坐(zuo)(zuo)標(biao)(biao),在坐(zuo)(zuo)標(biao)(biao)紙上繪出標(biao)(biao)準曲線,根(gen)據樣品的

OD 值由標準(zhun)曲(qu)線查出相應的(de)濃(nong)度;再乘以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數;或用標準(zhun)物的(de)濃(nong)度與(yu)OD 值計(ji)算出標

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度(du),再乘以稀釋倍數,

即(ji)為樣品的實際濃度。

 

六、注意(yi)事項

1.試劑盒從(cong)冷藏環境中取出應(ying)在室溫平衡15-30 分鐘后(hou)方可使用,酶標(biao)包被板開(kai)封(feng)后(hou)如未

用完,板條(tiao)應裝入密封袋(dai)中保存(cun)。

2.濃洗滌(di)液可(ke)能會有結(jie)(jie)晶析(xi)出,稀釋時可(ke)在水浴中(zhong)加溫助溶,洗滌(di)時不(bu)影響結(jie)(jie)果。

3.各(ge)步加樣(yang)均應使用加樣(yang)器,并經常(chang)校對其準確(que)性,以(yi)避免試驗誤差(cha)。一次加樣(yang)時間

控制在5 分鐘內(nei),如標本(ben)數量多(duo),推(tui)薦使用排槍加(jia)樣(yang)。

4.請每次測(ce)定的同(tong)時(shi)做(zuo)標(biao)準曲線,做(zuo)復孔(kong)。如標(biao)本(ben)中(zhong)待測(ce)物(wu)質(zhi)含量過高(樣(yang)本(ben)OD 值

大于(yu)標準品(pin)孔di一孔的OD 值),請先用(yong)樣品(pin)稀(xi)釋液稀(xi)釋一定(ding)倍(bei)數(n 倍(bei))后再測定(ding),計

算時(shi)請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5.封(feng)板膜只限一次(ci)性使用,以避(bi)免交(jiao)叉污染。

6.底物(wu)請(qing)避光保存。

7.嚴(yan)格按照說明書的操(cao)作(zuo)進行,試驗(yan)結果判定必須以(yi)酶標儀(yi)讀數為準.

8.所有樣(yang)品,洗(xi)滌(di)液和各(ge)種廢棄(qi)物(wu)都應(ying)按傳染物(wu)處理。

9.本試劑(ji)不(bu)同批號組分(fen)不(bu)得混用。

 

七.特別提醒

1.標本采集后(hou)盡早進行提取(qu),提取(qu)按相關文獻進行,提取(qu)后(hou)應盡快進行實驗(yan)。若(ruo)不能

馬上進行試驗(yan),可將(jiang)標本放于-20℃保存,但應避免反(fan)復凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制(zhi)辣(la)根過氧化(hua)物酶(mei)的(HRP)活性。

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